三聯玻璃發酵罐是一種由三個相同規格的全玻璃生物反應器組成的平行發酵系統,常用于微生物培養、菌種篩選及工藝優化等實驗室研究。其透明罐體便于實時觀察發酵狀態,具備pH、溶氧(DO)、溫度、轉速等參數的獨立控制功能。為確保無菌操作、數據可比性及設備安全,必須遵循規范的操作流程。以下是
三聯玻璃發酵罐的正確使用方法:

1、使用前清洗與滅菌:所有玻璃罐體、攪拌槳、電極及管路需用堿液或專用清洗劑刷洗,再用去離子水沖洗干凈。裝配后整體進行高壓蒸汽滅菌(121℃,30分鐘),或采用在位滅菌(SIP)程序。滅菌后通無菌空氣維持正壓,防止污染。
2、合理安裝傳感器:pH和溶氧電極應在滅菌前裝入,避免高溫干燒損壞。安裝時確保密封圈完好,接口擰緊但不過力,防止玻璃罐破裂。滅菌后校準電極:pH用標準緩沖液(4.01、7.00)兩點校準,溶氧在空氣飽和培養基中設為100%。
3、接種與無菌操作:通過火焰圈或無菌接頭將種子液接入罐內,全程保持罐內正壓。避免頻繁開蓋,所有補料、取樣均通過無菌過濾器或隔膜閥進行,防止雜菌侵入。
4、參數設置與監控:根據菌種需求設定溫度(通常30–37℃)、攪拌轉速(200–800rpm)、通氣量(0.5–2vvm)及pH控制范圍。三聯罐應設置相同初始條件以保證平行性,但允許個別調整以比較不同工藝效果。
5、防止泡沫溢出:高密度培養易產生泡沫,可手動或自動添加消泡劑(如聚醚類)。消泡探頭應正確安裝于液面上方,靈敏度適中,避免頻繁誤觸發。
6、運行中觀察與記錄:定期查看罐內濁度、顏色及氣泡狀態;同步記錄各罐的pH、DO、溫度曲線,發現異常(如溶氧驟升可能提示染菌)及時處理。
7、結束后的清潔與保養:發酵結束后立即排空廢液,用清水沖洗罐體,再用稀酸或酶清洗劑去除殘留蛋白。玻璃部件輕拿輕放,電極按說明書保存(如pH電極存于3MKCl溶液中)。